De desktop vriescentrifuge met lage snelheid wordt in het laboratorium gebruikt voor de primaire scheiding en extractie van biologische macromoleculen, sedimenten, enz. De draaibare kop is voornamelijk gemaakt van een aluminiumlegering, die van het platte type en het hoektype is. De centrifugaalbuis is gemaakt van hard glas, polyethyleen hard plastic en roestvrijstalen buis. De centrifuge is uitgerust met een aandrijfmotor, een timer, een regelaar (snelheidsindicator) en een koelsysteem (instelbaar temperatuurbereik is - 20 ~ 40 ℃), die de roterende koppen kunnen vervangen door verschillende capaciteiten en verschillende soorten rotatiesnelheden volgens aan de behoeften van het centrifugale materiaal.

Gedetailleerde stappen van centrifugatie voor extractie van cytoplasmatische en nucleaire eiwitten door desktop vriescentrifuge met lage snelheid:

1. Bepaal de celgroeitoestand. De celgroei moet 80% of beter zijn:

2. Centrifugeer gedurende 5 minuten bij 1500 omw/min

3. Gooi het supernatant weg, was de cellen met een gelijk volume koude PBS en herhaal 3 keer zoals in stap 2

4. Voeg, afhankelijk van de geschatte neerslaghoeveelheid, 5 keer het volume isotoon sisbuffer toe aan de celdeeltjes om de cellen voorzichtig te laten ophangen en schuim zoveel mogelijk te vermijden

5. Voeg lysisbuffer toe aan de gesuspendeerde cellen en plaats het gedurende 15 minuten op het ijs om de cellen te laten uitzetten, wat kan worden gecontroleerd met een microscoop

6. Voeg voor de geëxpandeerde cellen in het celexperiment 10% IGEPALCA-630 toe om de uiteindelijke concentratie 0,3% te laten bereiken, meng goed en voeg voorzichtig toe

7. Centrifugeer onmiddellijk (gebruik een EP-buis van 1,5 ml bij 5500 omw/min gedurende 30 seconden voor grote hoeveelheden; gebruik een buis van 50 ml bij 5500 omw/min gedurende 2 minuten voor grote hoeveelheden)

8. Breng supernatant (cytoplasmatisch eiwit) over naar een nieuwe vriesbuis

9. Suspendeer cellen met 5 keer het volume aan gesuspendeerde deeltjes in isotone buffer en meng goed

10. Centrifugeer de celsuspensie gedurende 5 minuten bij 1500 omw/min en verwijder het supernatant

11. Suspendeer deeltjes met 2/3 keer het volume extractiebuffer

12. Plaats de buis op de vibrerende mixer, schudden en mixen bij 700r/min gedurende 15min, en dan bij 1400r/min gedurende 15min. Het hele proces moet voorzichtig zijn om schuim te voorkomen

13. Centrifugeer gedurende 15 minuten bij 9400 omw/min, breng het supernatant over in een nieuwe bevroren centrifugebuis na centrifugatie bij lage temperatuur

14. Verdeel in verschillende delen en bevries ze met vloeibare stikstof en bewaar ze (opslag op lange termijn moet bij - 80 ℃ zijn, opslag op korte termijn moet bij - 20 ℃ zijn)